免疫测定中的固相支持物
免疫测定中的
抗原抗体反应是在固相表面上进行的，因此，选择适当的固相及采用适当方法将特定的抗体或抗原吸附于固相上，是成功地建立一个免疫测定方法的基础。
免疫测定的固相支持物一般有聚苯乙烯、聚氯乙烯、硝酸纤维素膜等，但目前国内外一般均使用聚苯乙烯塑料，我们常用的试剂盒内微孔板条就是聚苯乙烯塑料制成的。之所以聚苯乙烯塑料能得到广泛应用，主要是因为这种材料具有很好的光透性和蛋白吸附能力，且很容易加工成试管、微孔板、微球、珠、膜等具体形状的固相，此外，价格低廉。以前，国内厂家生产的用于
ELISA测定的聚苯乙烯微孔板条，由于原材料质量不高及工艺水平低，造成ELISA测定时的孔间变异大，难以满足高质量的测定要求。现在国内用于微孔板条生产的聚苯乙烯基本上均为进口，工艺水平也有较大提高，故生产的微孔板条用于ELISA测定的孔间变异大大减小，但与国外的高品质微孔板条相比，尚有一定差距。
聚苯乙烯塑料的主链结构为碳链，侧链带有非极性基团，因此，以聚苯乙烯为原料生产的试管、微孔板和微球等表面呈疏水性。一般认为，大分子间可通过范德华力(包括氢键)、离子键、疏水键和共价键而产生相互作用。范德华力是大分子间由于定向、诱导和分散效应所致的相互作用，作用力很弱。离子键是正负电荷之间的一种静电吸引作用，但在水溶液中带电离子更倾向于与水分子形成水合离子，因此，大分子间的离子键作用亦很弱。疏水键是非极性基团为避开水相而群集在一起的作用力。蛋白质分子中含有多种带非极性侧链的氨基酸残基，这些疏水性侧链间以及它们与蛋白质主链骨架的a—CH基团间倾向于形成疏水键。当抗体或蛋白抗原被动吸附于固相时，疏水键是其吸附于聚苯乙烯等疏水性固相表面的主要作用力。而亲水性的生物分子，由于它们与溶液中水分子形成氢键的作用力要大于靠疏水键与固相的作用力，因而难于被动吸附于疏水性固相表面；同样，小分子生物活性分子如药物、多肽等，由于它们分子量小形成疏水键的可能性大大降低，故而在固相表面的吸附也比较困难。
