中美科技生命科学产品目录
多聚物标记试剂PowerVision法
 
    1999年Shi等推出了一种新的多聚物标记试剂,称为PowerVision试剂,并比较了其他二步法,结果发现PowerVision试剂的检测效率要高于EnVision法。例如,利用相同一种抗体1:320稀释,PowerVision法呈强阳性,而其他二步法呈弱阳性或阴性结果。同时用40年前的存档蜡块,结合AR技术,检测P53、P27kipi和P21wAri,二步法PowerVision获得强阳性表达。PowerVision系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子,呈串珠状排列,由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子,与酶和免疫球蛋白交联,排列紧密,形成串珠状多聚物,因此相对分子质量较小。其特点是简便、敏感。其操作流程同EnVision法,但一抗的稀释度可在EnVision法基础上作进一步PowerVision法操作流程如下(所有的步骤均需在室温条件下完成)。
 
 
    (1)4um常规石蜡切片脱蜡至水,PBS洗3minX3次。
    (2)预处理组织切片(可用酶消化或AR或不作任何处理,依一抗质量而定)。
    (3)PBS洗3minx3次。
    (4)0.3%Hc02阻断内源性过氧化物酶15min,PBS洗3minX 3次。
    (5)适当稀释特异性一抗,室温孵育1h,PBS洗3minX3次。
    (6)滴加山羊抗小鼠(或兔)IgG—HRP多聚物(PowerVisi。n),室温孵育30min,PBS洗3minX3次。
    (7)0.04%DAB—0.03%H202显色8—12min。
    (8)水洗后,苏木精衬染1~3min,水洗蓝化5~10min,盐酸乙醇分化5s,水洗5min,系列乙醇脱水,常规树胶封片。
落款