CSA法的双倍放大和连续放大
 
    CSA的循环使信号放大作用显著增强,与ELF技术结合应用也相当有效果,与常规IH&DAB或NBT/BCIP显色剂结合用也可获得进一步的信号放大。
 
    举例来说,在第一循环生物素—XX酪胺酰胺能沉积在靶目标(抗原或核酸分子)上,下一步使用链霉亲和素—HRP交联物结合AlexaFluor酪胺酰胺或俄勒冈绿4488酪胺酰胺、太平洋蓝酪胺酰胺,或再用一循环生物素—XX酪胺酰胺。大概这种放大可连续3个循环,这样可能会造成某些空间分辨率的损失。
 
    最先沉积在生物素标记的探针结合位点的生物素酪胺酰胺,可使用HRP的链霉亲和素交联物进一步放大,或使用碱性磷酸酶的链霉亲和素交联物,结合用ELF-97磷酸盐继续放大,可进行低拷贝mRNA的超敏检测(Breininger,2000)。
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