四乙基罗丹明标记抗体方法
①取1gRB200及PCI5 2g放在乳钵中研磨5min(在通风橱中操作)。
②加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌，过滤，用滤液进行标记抗体。余下部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。
③取抗体(20mg／mi)，每毫升加入生理盐水和0．5mol／L(pH9．0)的碳酸盐缓冲液各lml稀释。
④逐滴加入0．1mlRB200溶液，边加入边搅拌，水透析5～7h。
⑤经葡聚糖凝胶GS0柱层析，除去游离荧光素，
四甲基异硫氰酸罗丹明标记抗体方法
在0～4℃中结合2～18h，再用生理盐分装，贮存于4~C备用。
①取IgG 10ml(6mg／mi)，在0．1mol／l(pH9．5)碳酸盐缓冲液中透析过夜。
②将四甲基异硫氰酸罗丹明(每毫克IgG加入5—20／xg)溶于二甲基亚砜(1mg／mi)，取此溶液300~1，一滴一滴加入蛋白质溶液中，同时电磁搅拌。
③在室温中搅拌2h，避光。
④把结合物移人直径3cm、高30cm大小的Bio-Gel P—6层析柱，用0．01mol／L pH8．0的PBS平衡过滤，流速为1．5ml／min。
⑤收集先流出的红色结合物，即为标记抗体，分装，4~C保存备用。
