ABPAP法是PAP法和ABC法的联合应用，使更多的酶分子结合到抗原—
抗体复合物上，目的就是增加方法的敏感性。其原理见图4—11。作者应用了30余种特异性一抗、鼠源性和兔源性PAP复合物以及ABC检测系统，结果ABPAP法比单一的PAP法要敏感7～8倍，比单一的ABC法要敏感1～4倍。
ABPAP法操作步骤如下。
(1)4／lm石蜡切片58℃烤片4h，切片常规脱蜡至水，PBS洗3rain×3次。
(2)蛋白酶消化或AR(组织抗原的暴露或抗原的修复，此步视情况而定)。
(3)0。3％H：02处理切片20min(室温)，PBS洗3min×2次。37℃60min)，PBS洗3min×3次。
(6)滴加桥抗体(二抗)，37℃孵育30rain，PBS洗3min×3次。
(7)适当稀释的PAP复合物(要求与特异性一抗同一种属)37℃孵育30min。
(8)PBS洗3minX3次。
(9)适当稀释的生物素化羊抗兔或抗鼠二抗(根据PAP复合物种属而选择不同的二抗)37~C孵育30min，PBS洗3rain×3次。
(10)适当稀释ABC复合物37℃孵育30rain，PBS洗3min×3次。
(11)0．04％DAB-0．03％H202显色8～12rain。
(12)水洗、复染、脱水、树胶封片，观察结果。
