(一)亲和细胞化学方法断
该方法的基本原理见本书第五章“亲和免疫组织化学技术”。将各种可标记的荧光染料标记在生物素或链霉亲和素(streptavidin)上，通过生物素化二抗与特异性一抗结合，链霉亲和素—荧光染料再与二抗上的生物素结合，使更多的荧光染料结合到抗原抗体部位，此时如荧光信号不够强，还可用生物素化荧光染料与未饱和的链霉亲和素结合，使信号得到进一步放大。
如果还想对信号作进一步放大，可用抗荧光素的标记荧光二抗，或用生物素标记抗亲和素二抗，然后再用荧光素标记链霉亲和素，其原始信号能更进一放大。
(二)级联抗体放大法
级联抗体放大法是利用现有的抗荧光素、抗第二抗体和抗半抗原(生物素、地高辛等)抗体对信号进行放大。例如间接法免疫荧光染色(FITC)后，可用抗FITC标记荧光素与FITC结合，也可用抗FITC标记AKP使其改变颜色，还可以用抗标记有荧光素的二抗与间接法上二抗结合，使信号进一步放大。
放大信号的步骤越多，其敏感性肯定越高，但其特异性可能会得不到有效保证。目前上述试剂均有商品化供应，只有合理使用，级联放大作用才能发挥最大效果，使非特异性染色降低到最低。
