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催化信号放大法CSA免疫荧光检测流程
 
    (1)常规  4ktm石蜡切片贴在涂有切片黏合剂的干净载玻片上,58℃烤18h,常规脱蜡至水,0.01mol/L(pH7.4)PBS洗3X3min。
 
    (2)抗原修复  微波3档(98℃)20min,室温中自然冷却20min,0.01mol/L(pH7.4)PBS洗3X 3min。
 
    (3)滴加适当稀释特异性一抗(如用P53一抗,可以1:5000~10000稀释),4℃过夜,PBS洗3X3min。
 
    (4)EnVisionTM试剂(HRP),37℃,30min,PBS洗3X3min。
 
    (5)0.007mol/L生物素化酪胺酰胺(内含0.003%Hz02),37℃,12min,PBS洗3X3min。
 
    (6)链霉亲和素—PE结合物1:100,37℃ ,40min,PBS洗3X3min。
 
    (7)50%甘油TB(pH9.0)封片。
 
    (8)荧光显微镜观察。
 
    如果荧光信号弱,还可以从第(4)步开始重复几次,使阳性信号获得明显改善为止。
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