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SS-B(La)抗体自身抗原
 
    1.定义  La是广泛分布于组织细胞中的磷酸蛋白,分子量47kD与细胞内5sRNA、tRNA前体、7sRNA、hyRNA及某些病毒RNA等多种小RNA相关。La蛋白分子中有80个氨基酸区域与上述RNA 3,—端一段短的尿苷酸序列相结合。现认为这是包括核糖核酸蛋白RNPl、RNP2在内的蛋白与RNA结合的模式(图2—4)。La很可能是RNA聚合酶Ⅲ的转录终止因子,具有ATP酶活性,体外试验显示La能将杂交的DNA/RNA溶解。此外,La蛋白在细胞核、胞质中来回穿梭,提示与细胞内相关RNA的成熟和(或)运输相关。
 
    2.来源  免疫荧光法显示La主要位于细胞核内,胞质内也存在。紫外线照射细胞及病毒感染后La可迁移至细胞膜并表达于细胞表面。
 
    3.纯化方法  天然La蛋白可用多聚尿嘧啶—Sepharose亲和层析以及La单克隆抗体免疫层析法纯化。利用PGEX、PQE原核表达系统可获得毫克量的可溶性重组La蛋白。PGEX表达系统将重组La蛋白与GST形成融合蛋白的形式表达出来,再以谷胱甘肽亲和层析柱纯化出融合蛋白。PQE表达系统则是形成La与6个组氨酸融合蛋白,以镍离子亲和层析柱纯化La融合蛋白。
 
    4.蛋白序列及抗原表位  La蛋白由408个氨基酸构成,分子量47kD,含有RNA识别的位置(RRM)、ATP结合位点及核定位信号。人的La基因含11个外显子,mRNA转录起始部位可能有一个富含G/C的启动子。ATP结合区及核定位信号位于C—末端区。应用重组的Ia片段分析其抗原表位发现,其“有三个构型抗原表位,分别位于NH:末端、RRM内及C—末端。B细胞主要直接与La蛋白的构型表位反应;线性表位尚未完全明确。
Ro/La  核糖核酸蛋白复合物模型
注:丸La通过其RNA识别区(thepoly-U。fhyRNAs)-~R。作用;且La  的主要结构特征和免疫表位。不连续表位位于NHz—末端;RRM区含有RNPl、RNP2 RNA-~白的两个序列相同区;免疫沉淀法La阳性血清能与LaA,LaCl及C—末端表位(LaL2/3)结合
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落款