抗小核糖体核蛋白自身抗原
1．命名及结构 snRNP广泛存在于细胞核内，在细胞代谢中起重要作用。snRNP包括非Sm抗原的7SK RNP，RnaseP RNP和端粒酶RNP，以及拼接体。Sm抗原包括U1、U2、U4、U5、U6、U7、U11和U12snRNPs。U1、U2、U7 snRNPs以同等数量颗粒形式存在，而U4、U5、U6 snRNPs在生理情况下，以三聚体形式存在。目前大多数相关研究中采用纯化的U4／U6二聚体和U5单体。U11和U12 snRNPs可能是功能性二聚体。每个U snRNP均由其各自相应的富含尿嘧啶的小RNA和多肽组成。每个U snRNPs除U6 snRNP外均含有特异的2，，2，7—三甲基鸟苷(mxG帽子)。U6 snRNP具有广甲基磷酸。这些snRNPs分子中还存在几个RNA-RNA作用位点和蛋白结合位点，其中包括Sm抗原多肽B’／B，D1、D2、D3、E、F、G多肽的结合位点。此外，每个snRNP含有其拼接功能所必需的特异性的蛋白成分(表2—7)，通过一系列的RNA—RNA、RNA-蛋白和蛋白—蛋白间的相互作用来完成前mRNA的剪切、内含子拼按组装功
能。
2．抗原及抗原表位 抗snRNPs抗体能认别snRNPs颗粒中的蛋白抗原表位，包括m：G帽子。典型的Sm抗体识别B／B，、D靶抗原，非典型的Sm抗体识别E、F、G抗原；U1—snRNP抗体识别U1—snRNPA或C多肽；U2特异性抗体通常识别U2—特异性A，或B，多肽。
U1、U2 snRNP分别存在于等数量的颗粒中；U11、U12 snRNPs以二聚体形式存在；U4、U5和U6 snRNPs形成有功能的三聚体，经纯化后获U4／U6二聚体和等数量的U5 snRNP，所有拼接小体snRNPs具有Sm核心蛋白。核心蛋白包括B，、B／／及9种不明特征蛋白(35、53、10、66、92、110、120、150、160kD)；U4／U6 snRNP包括至少一种120kD的特异性蛋白；U5 snRNP包括8种特异性蛋白(15、40、52、100、102、116、200、205kD)；三聚体U5 snRNP包括7个特异性的、不明特征蛋白。U7 snRNP可能含有至少7个特异性蛋白(13、5、18、23、34、44、50kD)；U1l snRNP至少含有62、65、140kD的三种特异性蛋白。U12 snRNP的特征目前尚不清楚。抗snRNPs抗体的一些表位与某些致病蛋白有同源性，如单纯疱疹病毒1型ICP4蛋白、HIV—lgpl20／41、流感病毒B型M1间质蛋白等。SrRB!／B、U1A和U1C1蛋白在C—末端有相同的表位，被称为PP／aPGMR／iPP。然而这些所有蛋白均含有构型表位和线性表位。上述同源性表位的生理意义尚不清楚。
此外，重组抗原的发展避免了繁杂的纯化过程。例如，用大肠杆菌表达U1 70K、A和C蛋白，以及SmB、D、E蛋白，并能分段表达以研究其抗原表位。
3．纯化方法 研究抗snRNPs抗体需要不同纯度的snRNPs抗原。通常以牛胸腺为源料，制备粗制的或部分纯化的snRNPs。高纯度的天然snRNPs，可经过抗2，、2’、7—三甲基鸟苷抗体亲和层析获得。如随后再进行快速蛋白液相层析、甘油梯度离心，可获得U-snRNP单体。
