组蛋白(H2A—H2B)—DNA自身抗原
1．特点 组蛋白有五种H1、H2A、H2B、H3租H4，在真核
细胞中，组蛋白与DNA紧密结合形成核小体。核小体中心由(H3—H4)2四聚体组成，H2A—H2B二聚体位于其两侧(图2—2)。核小体被大约146个碱基对的DNA缠绕，多个核小体串联在一起，中间靠H1(有20～60个碱基对DNA围绕)连接，这种结构再进一步弯曲、折叠即形成染色质。用微球菌核酸酶和3M脲素消化核小体，分解出3个亚基：H1与60—70个碱基对DNA复合体；H2A—H2B与50—60个碱基对DNA复合体以及(H3—H4)2与70～80个碱基
对DNA复合物。在合适的条件中，这些组蛋白—DNA复合体处于可溶性稳定状态。
核小体的结构图
2．来源 H2A—H2B二聚体或(H2A—H2B)—DNA复合物无商品供应。体外合成的H2A—H2B复合物不纯，易混有H2A、H2B单体。H2A、H2B单体也能与抗体结
合，因而以此种抗原建立的免疫测定法，容易出现假阳性。H2A—H2B复合物最佳的来源是将天然染色质消化后纯化。
3．纯化方法 以牛胸腺为原料，采用酶消化、超速离心、层析等方法纯化(H2A—H2B)复合物。将H2A—H2B与DNA在2M NaCl中混合，获得(H2A—H2B)—DNA复合物。要注意DNA原料不能含有单链DNA，否则抗体与单链DNA反应，将产生假阳性结果，采用天然的双链DNA可避免假阳性。
4．抗原序列及其表位 牛和人的H2A、H2B氨基酸序列相同，因此通常从牛胸腺组 织提取组蛋白用于筛选人抗体。目前尚不清楚H2A—H2B二聚体中的哪一区域构成抗(H2A—H2B)—DNA的抗原表位。H2A、H2B分子上的一些被DNA分子缠绕的氨基酸序列，推测这些区域与DNA分子共同构成抗原表位，诱导自身抗体产生。H2A、H2B也存在线性表位诱导抗组蛋白抗体。在SLE、药物性狼疮、先天性类风湿关节炎和其他一些自身免疫性疾病中可出现抗组蛋白抗体。
