间接放射免疫法检测跨膜型肿瘤坏死因子(TNF)
 
    1．   材料 
    ① 1％多聚甲醛；
    ② 3％牛血清白蛋白(BSA)，溶于PBS；
    ③ 兔抗TNF的抗血清；
    ④ “I标记的驴抗兔IgC抗体。
 
    2．操作步骤
    (1)将105巨噬细胞／fL用1％多聚甲醛固定于PVC板。
    (2)用PBS洗去多余甲醛。
    (3)加3％BSA，37cC孵育1h，以封闭非特异性结合位点。
    (4)弃上清，加1：50稀释的兔抗TNF血清，以免疫前兔血清为对照，37~C孵育45min。
    (5)用PBS洗三次，以去除未结合的抗体。
    (6)加入125I标记的驴抗兔IgC抗体(2 000cpm／孔)，37C，孵育45min。
    (7)用PBS充分洗板后，卜计数仪测量放射活性。
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