IL-8多形核白细胞(PMNL)酶释放法
 
    (1)淋巴细胞分层液分离外周血
细胞,弃去上层血浆和淋巴细胞。
    (2)将沉淀的红细胞和白细胞悬浮于2.5%明胶层上(用0.9%NaCl配制),37C孵育30min。
    (3)收集富含PMNL的上清,用0.83%N1lCl裂解残存红细胞,然后在2%BSA-PBS液内低速离心3次,以除去污染的血小板。收集PMNL后悬浮于无Ca2+、Mg2+的PBS液中。
    (4)待测样本溶于完全PBS液中(PBS内含0.1%BSA,0.9mmol/LCaCl2,0.49mmol/LMgCl2),测定前,上述细胞悬液用细胞松弛霉素B(5ug/mL)处理,然后加入待测样本,共孵育30min,离心收获上清测髓过氧化物酶活性(加底物如邻苯二胺,2mol/L H
2S0
4终止反应,测OD值)。