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MTF比色法测定slL-1的生物活性
 
    四甲基偶氮唑盐[3—(4.5-dimethylthiazol-2-Y1)-2,5-diphenyltetmzolimnbromide,MTF)在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用下,被还原成蓝黑色的MTr-甲脂,形成MTr-甲鐕的量与细胞增殖程度呈正相关。故通过测定细胞形成MTF-甲鐕量,可间接定量分析细胞的增殖情况,具体步骤如下:
    (1)用PBS溶解MTT为5mg/mL,用0.22/zm膜滤器除菌及杂质。
    (2)加MTF至培养的细胞及IL-1样品中,10uL/孔,37~C温育4ho
    (3)于每孔加酸化异丙醇100t~L/孔,充分混匀以溶解底物。酸性条件使培养液中酚红指示剂变为黄色,以利于对MTr-甲脂转化物的测定。
    (4)将微量测定板置室温数分钟,保证转变的底物结晶被溶解。
    (5)置酶标仪,调整检测波长为570nm,参考波长为630nm。测定应在酸化异丙醇加入后1h内完成。
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