将豚鼠血清用水合肼或氨水处理去除其中的C4，这种C4缺乏血清(简称R4)不能使致敏的SRBC溶解，当加入含有C4的受检血清后，级联酶促反应发生即可导致致敏的SR，BC溶解。溶血的程度与待测血清中C4的活性相关。

 

    1．无补体C4-抗原抗体复合物(EAR4)的制备  在新鲜豚鼠血清中按每mL加0．15mol／L氨水0．25mL或0．075mol／L水合肼0．25mL，混合后置37~C水浴30～90m／n，灭活其中的C4。用1mol／LHCl调节至pH7．2备用，取5％SRBC悬液与等体积4U溶血素混合为EA，然后按EA4mL与R40．25mL混合，室温放置15rain后使用。

 

2．在试管中加入反应物。

 

3．结果判定  按CH50方法进行。正常范围为8．270±2．087U／mL。

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