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寡核苷酸切除和脱保护
 
    寡核苷酸3,—OH和琥珀酰连接臂之间的酯键的切除在全自动合成仪上是自动进行的,但也可以按照下列方法手工完成,全部操作都在通风柜内进行。所需材料为:浓氨水溶液,带螺盖的小瓶(5m1),1.0ml气密性注射器,旋转蒸发器或快速真空干燥器。
 
具体操作步骤如下:
    1)合成后,用氩气干燥合成柱。
    2)干燥合成柱后,从仪器上将其取下。用lml浓氨水溶液充满注射器并将注射器接到柱的一端。将柱的另一端装上一luer接头和一针头,将氨水溶液注入柱中,直到第一滴冒出针尖。此时,柱子内的固相载体应该完全浸泡在氨水溶液中。
    3)将针插入橡皮塞中使注射器密封,在室温下放置lh。
    4)取下注射器针上的橡皮塞,将氨水溶液通过柱子压人螺盖的小瓶中,暂时拧上盖子,重复步骤l~4次。最后拧紧有3次氨水洗涤液的小瓶子。
    5)要完成碱基脱保护,将样品在55‘C下过夜。小瓶冷却到室温,取下盖子,全部脱保护的寡核苷酸转移到50ml的圆底烧瓶中,蒸发至干,为进一步纯化备用。
【技术支持】胶体金蛋白结合物的质量鉴定 【技术支持】免疫球蛋白IgA的提取分离纯化技术
【技术支持】胶体金标记蛋白的纯化 【技术支持】免疫球蛋白IgM的提取分离纯化技术
【技术支持】胶体金标记蛋白的制备 【技术支持】IgG的简易快速提取法
【技术支持】含醛基或酮基的小分子蛋白的交联 【技术支持】ELISPOT培养板的选用
【技术支持】含羟基的小分子蛋白的交联 【技术支持】关于ELISPOT试验技术中对细胞的处理
【技术支持】含氨基或可还原的硝基的小分子蛋白的交联 【技术支持】ELISA显色和比色的方法
【技术支持】含有羧基或羧基化的基团的小分子蛋白的交联 【技术支持】磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法)
【技术支持】热诱导的抗原修复(AR)的影响因素 【技术支持】免疫组化细胞标本的制备
【技术支持】热诱导的抗原修复(AR)的应用范围 【技术支持】β-半乳糖苷酶用于ELISA的标记用酶
【技术支持】热诱导的抗原修复操作方法 【技术支持】碱性磷酸酶用于ELISA的标记用酶
【技术支持】载脂蛋白AI标准品的(ELISA)标准化校准 【技术支持】辣根过氧化物酶用于ELISA的标记用酶
【技术支持】寡核苷酸切除和脱保护 【技术支持】影响DNA合成的实验结果的因素
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【技术支持】不同型号DNA/RNA合成仪的特点与性能简介 【技术支持】DNA合成的磷酰二酯法
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落款