可溶性IL-2B含量的测定
测定可溶性IL-2R(solubleIL-2R，slL-2R)含量的方法简便，取材容易，所需样本量小。因此不但可用于免疫学基础理论研究，还可作为临床某些疾病辅助诊断、病情监测及药效观察的一项指标。
根据检测原理不同，slL-2R含量的测定方法主要有二类，即双抗体夹心法和竞争法，其中以双抗体夹心法更为简便，敏感且常用。
1．双抗体夹心法 需选用两株针对slL-2R不同位点的McAb，其原理、操作步骤及注意事项请参阅第五章。若需提高敏感度，尚可使用荧光ELISA夹心法，即采用生物素标记McAb2，进行生物素-亲合素-酶放大步骤，并采用荧光物质为底物，其敏感度可达10U／mL以下，但操作步骤多，实验要求高。
2．ELISA竞争法 本法是用纯化的或重组IL-2R(P55)蛋白包被微孔板，同时加入已知量的抗IL-2RMcAb和待检slL-2R。待检slL-2R与包被的纯化IL-2R蛋白竞争与抗IL-2R抗体结合。从抗IL-2R抗体与包被IL-2R蛋白结合受抑制的程度计算待测slL-2R的含量，操作步骤如下：
(1)以重组或纯化IL-2R(1>55)40 000U／mL{g被聚苯乙烯板，每孔100t~L，4℃过夜。
(2)1％BSA-PBS封闭，每孔200~zL，置室温2ho
(3)洗涤后加入50ul不同稀释度的标准品及待测样品，稀释液为1％BSA／PBS。同时加入50ul FITC标记的抗IL-2RMcAb(0．2ug／mL)，充分混匀置室温2h(FITC为异硫氰酸荧光素，这里仅作为半抗原)。
(4)洗涤后各孔加入碱性磷酸酶标记的兔抗FITC 100gL，置室温1h。
(5)洗涤后各孔加入1001~L底物溶液(对硝基苯磷酸盐1mg／mL，用pH9．8的二乙醇胺缓冲液溶解)。以波长405nm测OD值。
(6)以标准品的OD值绘制竞争抑制标准曲线，OD值随slL-2R浓度的增加而降低。
(7)根据待检样品的OD值在标准曲线上查出slL-2R含量，不需计算抑制百分率。
(8)注意事项：
①本方法的敏感度为5 000U／mL，因此不适合检查正常人标本，仅适用于检测接受抗IL-2R抗体治疗，毛细胞性白血病等slL-2R水平极度增高的患者，以及作为检测移植排斥反应的指标；
②若无纯化或重组IL-2R蛋白，可用PHA刺激的末梢血单个核细胞或MT-2细胞包被微孔板，吹干，固定，用1％H202处理抑制内源性过氧化物酶后即可用。
