捕获法ELISA检测HBsAg/C3-CIC
抗原/C3是所有激活补体的抗原类CIC的总和,如以抗C3为包被抗体,则对探讨某类抗原特异性IC的病理作用具有重要意义。现将捕获法ELISA检测HBsAg/C3—CIC介绍如下:
在聚苯乙烯微量反应板内加入抗人C3的羊IgG,0.1ml/孔(10ug/mL),4℃作用24h。用PBST洗涤3次;加入0.1mL用生理盐水按l:10稀释的待检血清,每份标本2复孔,同时设阴、阳性对照,置4cC24h。同上洗涤,加0.1mLHRP-抗HBs(用含10%羊血清的PBST稀释),25℃作用4ho同上洗涤,加0.1mL新鲜配制的OPD-H202底物溶液,25℃反应15min;加0.05mL2mol/LH2S04终止反应。用酶标仪测492nmOD值,根据2复孔的OD值,以P/N值大于或等于2.1者判断为HBsAg/C3-CIC阳性。
临床意义:HBsAg/C3-CIC阳性率与肝损伤严重程度明显相关,表明其可能在HBV引起慢性活动性肝炎、重症肝炎和肝炎后肝硬化的发病过程中起重要作用。在慢性肝病患者中,HBeAg阳性者,HBsAs/C3-CIC的检出率显著高于HBeAg阴性者;在聚合人白蛋白受体(PHSAR)阳性者中检出率亦显著高于PHSAR阴性者。而急性乙肝的HBsAg/C3-CIC在HBV感染的急、慢性肝病中具有不同的病理生理意义。