白介素3IL-3)的诱生
 
    IL-3亦称多克隆集落刺激因子,主要由活化的CD4+T细胞产生,一些T细胞杂交瘤或T淋巴瘤细胞系可在刺激或非刺激条件下产生IL-3。它的产生及活性与T细胞的分化、增殖密切相关。另外,IL-3还参与骨髓干细胞的分化和增殖。
    (一)IL-3的诱生
    1.ConA诱生脾细胞上清  用ConA刺激BOFl小鼠或Swiss小鼠脾细胞,收集其培养上清获取IL-3。操作步骤基本同用小鼠脾细胞诱生IL-2。
2.WEHI-3细胞培养上清的制备
    (1)将WEHI-3细胞用Hanks液洗2次,用无血清培养液调整细胞浓度为2X106/mL,5%C02 37℃温箱中培养72h。
    (2)将细胞悬液充分混匀后3 000r/min离心15min,收获上清即为含ID3的标本。
    3.LBRM-33细胞培养上清的制备
    (1)将LBRM-33细胞洗涤后,调整细胞浓度至1X106/mL。
    (2)向上述细胞悬液中加入PI-IA(终浓度为1%)或ConA(终浓度20ug/mL)培养24h。
    (3)将细胞悬液充分混匀,3 000r/min离心15rain,收获上清即为含IL-3的标本。
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