白介素4(IL-4)的诱生
 
    IL-4主要是TH细胞经抗原或丝裂原刺激后产生,可调节B细胞及其他多种免疫细胞的功能。制备IL-4多取用正常组织细胞(如人脾脏、扁桃体、淋巴结)、外周血和大鼠或小鼠脾脏细胞等,传代细胞(如小鼠胸腺瘤细胞系EL-4细胞、L1/1细胞、MBI-1T细胞系)和一些T细胞杂交瘤,经抗原或非特异性激活剂刺激后获得。
 
    IL-4的诱生可用如下途径
 
    1.EL-4细胞经TPA或与ConA协同刺激时,可产生高效价IL-2和IL-4。
 
    2.L1/I细胞用特异性抗原或针对CD3分子的抗体刺激后,可产生IL-3、IL-4、IL-5、IL-6,而不产生IL-2、IFN-r。
 
    3.用ConA诱导Swiss小鼠或其他品系小鼠脾
细胞制备IL-4。
 
    4.外周血淋巴细胞(peripheralbloodlymphocyte,PBL)培养上清。
    (1)取肝素抗凝血10mL,用生理盐水稀释1倍,置淋巴细胞分层液上面,离心制备淋巴细胞悬液。
    (2)调整细胞浓度为1X 106/mL,同时加入PHA 100/le/mL或TPA 1ng/mL和A23187(钙离子载体)0.1ug/mL,培养液为8%NBS-IMDM或1%人AB血清-IMDM,37℃,5%C02温箱中培养24h。
    (3)离心,分离上清、滤过、分装、—20~C保存。