IL-4CD23单抗检测法
 
    IL-4能促进B细胞膜表面CD23分子表达,一些BurkittB淋巴细胞瘤株(如Jijoy细胞)未受刺激时,CD23表达水平很低,经IL-4刺激后,CD23的表达呈剂量依赖性增加。用抗CD23单抗间接免疫荧光法染色,可检测人IL-4活性。
 
    (1)将5X105/mL的Jiioy细胞培养于含10%FCS的RPMI-1640培养液中。
 
    (2)取对数生长期细胞,用新鲜培养液将细胞配成5X 105/mL,接种于24孔板中,lmL/孔。分别加待测标本及标准IL-4(不同稀释度),并设阴性对照,培养48~72h。
 
    (3)洗细胞2次,以106—107/mL浓度的细胞重悬于含1%BSA,2mmoL/L叠氮钠的PBS中。将细胞转人Falcon分析管中,离心弃PBS,加100~L抗CD23单抗(5—10btS/mL),置冰浴中15~30rain,用上述PBS洗2次。
 
    (4)加适当稀释的FITC标记的羊抗鼠IgC,置冰浴15~30rain,同上洗细胞,重悬细胞于含2mmol/mL叠氮钠的PBS中。
 
    (5)用流式细胞仪分析CD23分子的表达,以阳性细胞百分率表示,并计算IL-4活性单位;或用荧光显微镜观察CD23分子的表达。
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

【生物技术】成纤维细胞增殖法测定slL-1的生物活性 【生物技术】小鼠胸腺细胞增殖法测定slL-1的生物活性
【生物技术】MTF比色法测定slL-1的生物活性 【生物技术】白介素IL-1的诱生
【生物技术】EL-4NOB.1细胞系测定法测定slL-1的生物活性 【生物技术】可溶性IL-2B含量的测定
【生物技术】D10G4.1细胞增殖法测定slL-1的生物活性 【生物技术】细胞表面IL-2R(mlL-2R)的测定
【生物技术】IL-3检测的注意事项 【生物技术】白介素2(IL-2)的诱生
【生物技术】IL-3的检测(方法(检测IL-3的生物活性) 【生物技术】膜结合型白介素1(mIL-1)的测定
【生物技术】白介素3(IL-3)的诱生 【生物技术】IL-1的免疫学测定法
【生物技术】IL-2的生物学测定方法 【生物技术】亚适剂量抗IsM抗体刺激B细胞增殖法检测IL-4
【生物技术】IL-6的生物学检测法 【生物技术】IL-4的检测生物学及免疫学方法
【生物技术】白介素6(IL-6)的诱生 【生物技术】IL-4抗CD23单抗检测法
【生物技术】白介素5(IL-5)的检测 【生物技术】IL-4拮抗IFN的抗病毒活性测定
【生物技术】白介素5(IL-5)的诱生 【生物技术】白介素4(IL-4)的诱生