人α干扰素IFN-β的诱生
 
    采用超诱导法。所谓超诱导是指细胞在某种诱生剂和大分子合成抑制物的适当作用下发生的诱导蛋白合成增加的现象。环己亚胺和放线菌素D可明显延缓聚I:C诱导的人成纤维细胞干扰素mRNA的降解,使人IFN-p的产量提高10—100倍。
 
    1.将FS4
细胞(新生儿包皮成纤维细胞株,为IFN-p高产细胞株)在旋转瓶中用10%NCS-Eagle MEM液培养,待细胞长成单层后,36cc继续培养8~10d,其间换液一次。
 
    2.换用无血清Eagle MEM培养液,含IFN-p100U/mL起动培养16-24h。加聚I:C和环己亚胺,终浓度分别为50/zg/mL和10ug/mL。4h后加放线菌素D,终浓度为1ug/mL。
 
    3.2h后,终止诱导,用EagleMEM培养液洗细胞3次。
 
    4.继续培养18h,收集细胞培养上清,2 000r/min离心(4cC)30min,收集上清即为IFN-β粗制品。