γ-干扰素IFN-γ的诱生
 
    IFN-γ的诱生剂包括多种有丝分裂原,例如植物血凝素(PHA)、美洲商陆(PWM)、ConA、SPA、葡萄球菌肠毒素A和B(SEA和SEB)以及抗淋巴细胞血清(AIS)和抗人T细胞CD3 McAb等。
 
    1.常规方法分离人外周血单个核细胞
 
    2.用含5%正常人血清(或10%新生小牛血清)、10mmol/LHEPES、2mmol/L谷氨酰胺、100U/mL卡那霉素、pH7.2~7.4的1640液调整细胞浓度为5×106—10×106/mL。
 
    3.加PHA 50—100tzg/mL(或PWM 5~10ug/mL、ConA 10—20itZ/mL,均为终浓度),37℃培养48-72h。
 
    4.2000r/min离心20rain,收集上清液,除菌过滤即为IFN-7样本,20℃保存。
 

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