IL-18的检测
 
    11:18又称干扰素诱导因子,主要由活化的巨噬
细胞和库否细胞及成骨基质细胞和肾上腺皮质细胞产生。其主要生物学活性是诱导T细胞产生GM-CSF,促进T细胞增殖和增强NK细胞活性以及诱导THl细胞产生IFN-7。其诱导IFN-y和GM—CSF的能力及诱导CTLL-2细胞生长的能力强于IL-2,并与IL-2有协同效应。IL-18亦可诱导ID2的产生和促进Fas的表达以及抑制IL-10的产生。
 
    (1)C3H/H2J小鼠脾细胞增殖法:用ConA(5ug/mL)和系列稀释的IL-18样品共同刺激诱导IFN-y产生。再用ELISA法或病毒抑制试验检测细胞培养上清液中的IFN-7含量或活性,以此推测IL-18的活性。
 
    (2)人PBMC增殖法:取3×106/mLPBMC培养在含10%FCS的RPMI-1640培养液中,加入不同浓度的诱导剂(抗CD3抗体0.1ug/mL或10U/mL IL-2或ConA0.5ug/ml)和系列稀释的人IL-18待检样品。置37℃5%C02温箱中培养24h,用ELISA法或病毒抑制试验检测细胞培养上清液中的IFN-7含量或活性,以此推测IL-18的活性。1个单位的IL-18活性为IL-18与0.5ug/mLConA共刺激时,能诱导0.25mLPBMC(7.5X105细胞)产生1601U/mLIFN-y所需的IL-18量。
 
    (3)
51Cr释放试验:此法可检测IL-18诱导NK细胞杀伤K562细胞的能力,将人PBMC与系列稀释的IL-18样品共孵育24h,然后测定PBMC中的NK细胞活性。