IL-18的检测
 
    11:18又称干扰素诱导因子,主要由活化的巨噬细胞和库否细胞及成骨基质细胞和肾上腺皮质细胞产生。其主要生物学活性是诱导T细胞产生GM-CSF,促进T细胞增殖和增强NK细胞活性以及诱导THl细胞产生IFN-7。其诱导IFN-y和GM—CSF的能力及诱导CTLL-2细胞生长的能力强于IL-2,并与IL-2有协同效应。IL-18亦可诱导ID2的产生和促进Fas的表达以及抑制IL-10的产生。
 
    (1)C3H/H2J小鼠脾细胞增殖法:用ConA(5ug/mL)和系列稀释的IL-18样品共同刺激诱导IFN-y产生。再用ELISA法或病毒抑制试验检测细胞培养上清液中的IFN-7含量或活性,以此推测IL-18的活性。
 
    (2)人PBMC增殖法:取3×106/mLPBMC培养在含10%FCS的RPMI-1640培养液中,加入不同浓度的诱导剂(抗CD3抗体0.1ug/mL或10U/mL IL-2或ConA0.5ug/ml)和系列稀释的人IL-18待检样品。置37℃5%C02温箱中培养24h,用ELISA法或病毒抑制试验检测细胞培养上清液中的IFN-7含量或活性,以此推测IL-18的活性。1个单位的IL-18活性为IL-18与0.5ug/mLConA共刺激时,能诱导0.25mLPBMC(7.5X105细胞)产生1601U/mLIFN-y所需的IL-18量。
 
    (3)51Cr释放试验:此法可检测IL-18诱导NK细胞杀伤K562细胞的能力,将人PBMC与系列稀释的IL-18样品共孵育24h,然后测定PBMC中的NK细胞活性。
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