通过对B9细胞的反复克隆，筛选出对IL-11高度敏感的B9-11细胞株，可用于IL11的检测。

 

    1．B9-11细胞的克隆  ①向96孔培养板中每孔加入100uL含5％FCS和100ng／mL rIL-11的PMI-1640培养液；②加B9-11细胞于每孔l、3、9和27个细胞，每一细胞浓度做一板，培养2周，阳性生长孔定期更换培养液和补充rIL-1③取出生长较好孔内细胞，测其对IL-11的敏感度，所需IL-11浓度最低的细胞克隆为B9-11克隆。

 

    2．在96孔板中每孔加50rtl用含5％FCSRPMI-1640系列稀释的待测样品和5X10³B9-11细胞，每孔终体积为150$tL。5％c02 37~C温箱中培养4d

 

    3．加MTF温育4h，加酸化异丙醇溶解甲腊，测630nm—5701an的吸光度值。IL-11活性以UTll65表示，即B9-11细胞发生50％最大增殖时稀释度的倒数除以30(因B9-11细胞对IL-11的敏感度为T1165细胞的30倍)。

 

    4．注意事项  测定生物标本应加抗IL-6McAb以中和IL-6对结果的影响。

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