1．收集白细胞

    采血，ACD抗凝，24h内分离人外周血白细胞。

 

2．裂解红细胞

    加3倍量0．83％NH₄Cl，4℃作用10min，1 200r／min离心10rain，去上清，重复处理—次；加无酚红的Hanks液500r／min离心5min，去上清，重复2—3次。

 

3．诱生干扰素

    调整白细胞浓度为107／mL，诱生液为Eagle MEM营养液或1640营养液，内含2％iE常人血清，0．03％谷氨酰胺，卡那霉素100U／mL，pH7．2—7．6。先加入白细胞干扰素100U／mL，37℃起动2ho然后加新城鸡瘟病毒(NDV)-F系100血凝单位(HAU)／ml进行诱生，37℃转动或低速搅拌培养18-24h。

 

4．收获干扰素

    2 000r／min离心20rain，收集上清，调节至pH2．0，放4cC 5d使病毒灭活，然后再调节至pH7．2。除菌过滤，存放4℃冰箱内备用。

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