WISH -VSV微量细胞病变抑制法测定干扰素效价
 
    采用细胞病变抑制法(cytopathiceffectinhibition,CPEl),以能抑制50%细胞病变(CPEl50)的干扰素最高稀释度作为1个单位。每次测定应同时设干扰素参考标准品对照,将测定结果经过比较换算为国际单位(1U)/mL。
 
    (1)将ⅦSH细胞(人羊膜传代细胞株)接种于96孔培养板,置37℃5%C02温箱中培养12—18h使其生长成单层。
    (2)去除营养液,依次加入系列稀释的IFN检品,每个稀释度各加2孔。同时设不同稀释度的IFN标准品对照,细胞对照和病毒对照。37cC 5%C02温箱中孵育过夜。
    (3)去除IFN溶液,用100TCID5。的VSV攻击(细胞对照孔加不含病毒的营养液),再培养1—2do待病毒对照孔细胞全部或75%以上出现明显病变时,即可在倒置显微镜下观察结果或用结晶紫将细胞染色后,肉眼观察结果。
 
    细胞病变分为5个等级:
    “0”——无明显细胞病变;
    “1”——病变小于或等于25%;
    “2”——病变为25%—50%;
    “3”——病变为50%~75%;
    “4”——病变为75%-100%。
    (4)效价计算:按上述标准判断不同稀释度IFN检品对细胞病变的抑制程度。