实时荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR(real-timequantitativePCR)技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
实时PCR的主要优点在于在一种巨大的动力学范围内测量核酸分子浓度的能力，并且以它的高灵敏度与大容量的并行操作为特征，能同时检测许多样品。与传统的PCR产物的终点测量法不同，实时PCR提供关于PCR的动力学的瞬时信息，因此在不同样品之间扩增效率方面的差异能够通过计算获得补偿。
目前，三种最通用的实时PCR仪器是GeneAmp5700序列检测系统、ABI光谱7700序列检测系统(二者均由Perkin-ElmerBiosystem公司出品)和LightCycler。
在实时荧光定量
PCR技术的发展过程中，两个重要的发现推动了荧光定量技术的大力发展：在20世纪90年代早期，TaqDNA多聚酶的5，核酸外切酶活性能降解特异性荧光记探针的发现，使得间接地检测PCR产物成为可能；此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中实时地监测反应全过程得以实现。这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展推动实时荧光定量PCR方法在研究工作中的运用。
随着反应试剂、仪器和操作系统的不断发展和完善，以实时荧光PCR技术为核心的检测试剂盒纷纷问世，逐步趋向于呈现灵敏特异、快速精确和操作自动化的特点。当然，由于成本较高，操作难度较大，目前在临床疾病的诊断和治疗上还未得到普及。
因此，如何进一步提高检测方法灵敏度、简化操作程序、缩短检测时间、消除非特异干扰，以及采用统一的、标准化的方法已成为实时荧光PCR检测试剂盒未来研究的主要方向。许多研究者趋向于将更多的精力投入实时荧光定量PCR方法的研究开发，使之进一步最终自动化，来提高临床检验结果的准确性。
在不久的将来，实时荧光定量PCR技术将以其显著的优势，在分子生物学、实验医学，特别是在临床医学领域达到越来越广泛的应用。
