抗磷脂抗体是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体，包括抗心磷脂抗体(anticardi-

olipinantibody，ACA)、抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰胺醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸抗体等。国内一些单位对SLE、习惯性流产、神经系统疾病、急慢性白血病、肾脏疾病、消化系统疾病等研究发现，ACA与这些疾病的凝血系统改变、血栓形成、血小板减少等密切相关，并与疾病的发生机理也有关联。ACA较其他四种负电荷性磷脂抗体阳性率高，且敏感，故ACA检测日益受到重视。已建立了RIA和ELISA等方法。国内已有商品化的ELISA法检测ACA试剂盒问世，可以作为常规检查。

 

    1。试剂  ①纯心磷脂：可购买商品心磷脂(cardiolipin，CL)；②辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人IgC．、IgM、IgA。

 

    2，操作步骤  将纯心磷脂用无水乙醇配成12．5／／g／mL，加入干燥洁净的聚苯乙烯反应板，50~L／孔，置氮气下室温蒸发干燥。次日以PBS-T洗板3次后，以0．3％明胶封闭，150gL／孔，置37T1 90rmn，洗板3次。加1：1 000稀释的待测血清或阳性和阴性对照血清(稀释液为0．01mol／L，PBS-T，pH7．4，含4％PEG)，lOOgL／孔，置37~C湿盒反应2ho洗板5次后，加HRP-羊抗人ISC或Igm、IZA(以含1％BSA的PBS-T-PEG稀释成1：800)100~L／孔，置37~C湿盒反应1h。洗板5次后甩干，加新鲜配制的底物液i00／~L／孔(10ngOPD溶于25mL，0．1mol／L，pH5．0的柠檬酸缓冲液，加3％H20：20／~L)，37％反应10～15min，待充分显色后每孔滴加2mol／LU2S04 50gL终止反应，测各孔492nm吸光度(A)。

 

    3．结果判定与临床意义  标本及阳性、阴性对照均采用双孔测定，取2孔A值的平均值以P／N~>2．1判为阳性。