抗平滑肌抗体SMA的检测方法
 
    抗平滑肌抗体(smoothmuscleantibody,SMA)见于多种自身免疫病。鼠肝、肾、人甲状腺和血小板等组织与平滑肌的肌动球蛋白具有共同的抗原性。因此,以纯化的肌浆球蛋白为抗原可进行沉淀试验、间接血凝试验、放射免疫测定和酶免疫技术以检测SMA。但目前常用的是以平滑肌为抗原基质片的间接免疫荧光法,现介绍如下。
 
    1.平滑肌组织冰冻切片  将大鼠处死,剖腹取胃,切取一块胃壁组织,洗净后立即冰冻。用冷冻切片机切成4~6/1m,贴于清洁玻片上,迅速用电风扇吹干。置干燥器内4℃存放,可用1~2个月。
 
    2.操作步骤
 
    (1)将待测血清用0.01mol/L,pH7.4PBS作1:10稀释,以正常人血清和已知SMA阳性血清同法稀释作为对照。
 
    (2)将稀释血清滴加于底物片上,室温、湿盒内反应30rain。
 
    (3)用PBS流洗除去多余血清后,再于PBS中浸洗3次。分别为5min、5min、10rain(以下同)。
 
    (4)吹干后,滴加最适工作浓度的荧光素标记抗人IgC。室温、湿盒内反应30min后按上述方法洗涤。
 
    (5)吹干后,用无自发荧光的缓冲甘油封片,荧光显微镜检查。用鼠胃作底物片时,在粘膜下肌层呈现荧光为阳性。阳性时可将血清再进一步稀释以测定抗体滴度。
 
    3.临床意义  SMA主要见于自身免疫性(狼疮样)肝炎,可用以同SLE鉴别。原发性胆汁性肝硬化和慢性活动性肝炎时,此抗体检出率也高,但后者SMA效价甚低。急性病毒性肝炎时SMA阳性率可达80%,多在发病第1周出现。正常人SMA为阴性,中、老年人群中阳性率可达5%左右。
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