抗组蛋白抗体(AHA)测定
组蛋白是一种与DNA结合的富含赖氨酸与精氨酸的碱性蛋白，由H1、U2A、H2B、H3、H
4 5个亚单位构成。药物性红斑狼疮和SEE病人血清中有抗组蛋白抗体(antihistonic antibody，AHA)，RA病人血清中也可测到AHA。目前检测AHA方法甚多，但以EHSA法和荧光抗体法较实用。现介绍ELISA法检测AHA。
1．试剂 组蛋白抗原：可购买商品或从小牛胸腺中制备，并经SDS-PAGE证实有5个亚单位。
2．操作步骤 以2．5ug／mL组蛋白抗原200~L包被聚苯乙烯微孔板，置4℃ 20h后，弃去抗原包被液，加入0．3％明胶溶液以阻断未被抗原包被的部位。次日加入待测血清200uL(稀释成1：200)，室温孵育2h，经PBS-吐温及PBS缓冲液洗涤后，加入最适工作浓度的HRP标记的羊抗人IRC或羊抗人IgM各200mL，室温孵育2h后，分别以PBS-吐温和PBS溶液冲洗各3次，加入底物2，2’-连氮-双[3—乙基苯并噻唑啉-6—磺酸盐](ABTS)200uL，置室温孵育2h后，以410nm测定各孔吸光度(A)。A值大于正常值范围定为阳性。
3．正常参考值与临床意义 因检测方法不同，AHA的正常值范围也各异。应在建立方法后，各自订出正常值范围。如唐福林等(1990)采用上述
ELISA法检测AHA的A值X二0．324，2S：0．219(正常值范围0．105—0．543)，A值大于0.543视为阳性。
AHA在药物性狼疮病人中阳性率达90％—100％，且与Sm或RNP呈交叉反应，而自发性SLE病人中阳性率仅为20％—35％，且大多出现在疾病活动期，抗体是H1、H3-H4组分。以kG-AHA为主的SLE病人，其心包炎、肾炎、关节炎发生率高于以IgM-AHA为主的SLE病人，因此IeC-AHA测定有助于临床治疗的监测。BA病人的AHA阳性率也较高(可达36％)，以IgM-AHA为主，与AHA阴性者相比，关节外表现更为突出，可作为诊断时参考。
