环孢素A结合蛋白（CypA）三类Ig自身抗体的测定
环孢素A结合蛋白(cyclophilinA，CypA)是生物细胞胞浆中的一种结构高度保守的低分子量蛋白(18 000)，具有肽酰脯酰顺反异构酶(pplase)活性，在细胞内蛋白质合成、折叠和转运过程中起重要作用。因环孢素A(CsA)具有选择性免疫抑制作用而广泛用于防治器官移植排斥反应，其效应的发挥主要是通过细胞内受体CypA的存在而起作用的。CsA与CypA结合后，即可影响mRNA的转录和某些蛋白质的表达，抑制T细胞的增殖与细胞因子的分泌。虞伟等利用基因重组技术，克隆表达出人CypA产物作为包被抗原，建立了检测三类Ig抗体的间接ELISA方法，现将其方法简要介绍如下。
操作步骤 将重组人CypA(hcypA)抗原溶于pH9．6的0．05mol／LCBS缓冲液中，调整浓度至11ug／mL，包被聚苯乙烯反应板，100uL／孔，37℃ 1h后洗涤，加入l：50稀释的待测血清，同时没空白，阴性和阳性对照孔，43cC40min后洗涤，再分别加入HRP标记的抗人γαμ链抗体的F(ab’)
2，43℃40min，洗后加底物(OPD-H202)溶液，37℃避光显色5min，用2mol／LH：S04终止反应，空白调零，于492nm波长测吸光度(A)值。
