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免疫球蛋白IgE的提取分离纯化技术

   (一)材料与试剂
    1.血清
    2.饱和硫酸铵溶液
    3.洗脱液0.005Mol/L pH7.4PB液
    0.025 Mol/L pH7.4PB液
    0.01Mol/L pH7.4PBS液(0.14mol/L NaCl)
    4.DE52
    5.SephadexG150

   (二)操作方法
    1.取血清倍比稀释后,加等量饱和(NH4)2SO4溶液,盐析。
    2.离心取沉淀,溶于少量生理盐水中,透析、除盐。
    3.过DE52柱,以0.005Mol/L pH7.4PB液洗脱,收集洗脱蛋白峰(IgG),弃去。
    4.换以0.025Mol/L pH7.4 PB液洗脱,洗下的蛋白峰主要是IgE。
    5.透析除盐。
    6.过G150柱,以0.01Mol/L pH7.4PBS(0.14Mol/L NaCl)洗脱,收集洗脱液即为纯化的IgE。
    7. 浓缩、鉴定。
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