Spell等(1992)较为成功地将ELF技术应用于原位分子杂交(1SH)，应用生物素标记的着丝点特异性和甲状腺球蛋白DNA探针分别检测核分裂中期和间期的T24培养细胞和外周淋巴细胞。常规ISH后，经洗脱，连续滴加亲和素—AKP、生物素标记抗亲和素抗体，再加亲和素—AKP，PBS洗2X5min，用偶氮染料结合技术对ISH信号进行放大。

 

    具体流程如下：将切片浸入4ml 0．2mol／L(pH8，5)Tris盐、5％PVP(相对分子质量：40000)、lmg萘酚—ASMX-磷酸盐(溶在250~1无PVP的缓冲液中)和5rug坚固红TR盐(溶在750F1无PVP的缓冲液中)组成的溶液中，该溶液应混匀，用前过滤，即刻应用；显色15min，不得超过30rain；PBS洗3X3min；蒸馏水洗5min；甘油封片。该作者还利用ELF技术与常规荧光(FITC)标记方法进行原位分子杂交双重标记，可在同一激发光下同时观察两种不同的杂交信号。

 

    最近，Breininger(2000)和Grill等(2002)应用商品化ELF-97试剂盒和CSA(催化信号放大)方法连续对ISH信号进行放大，检测大鼠下丘脑中拷贝数很低的勒帕茄碱受体(Leptin receptor)和前鸦片黑皮质素(pro-opiomelanocortin，POMC)，结果表明利用任何单独一种信号放大方法均不能获得杂交信号。Zhang等(2004)利用原位杂交分别检测包埋在琼脂糖中的HIV—l mRNA、组织切片和细胞爬片中的HIV—1mRNA，并利用ELF技术对杂交信号进行放大。Small等(2001)将ELF放大技术应用到寡核苷酸微阵列(Microarray)检测的信号放大。

 

    Voilley等(2001)应用ELF技术对寡核苷酸分子杂交进行信号放大，并与常规免疫荧光组化进行多重标记。

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