抗着丝点抗体自身抗原
1．定义 着丝点是真核细胞染色体最初期形式，此时配对的染色单体最紧密配对结合。在着丝点的表面呈三片圆盘状结构，称为动原体，是细胞分裂时微管附着部位。过去认为ACA识别动原体的蛋白成分，1990年Pluta等确认其靶抗原位于着丝点内，而不是动原体，因而命名为抗着丝点抗体。三种主要靶抗原是CENP-A(19kD)、CENP-B(80kD)和CENP-C(140kD)。三种抗体通常同时出现。此外，还有抗CENP-D、CENP-E、CENP-F抗体，但很少见。
2．特性 着丝点抗原是不溶性的核间质蛋白，因而不易纯化。采用分子生物学技术克隆、表达、纯化的CENP-B或CENP-B的C—末端(147个氨基酸肽链)能够被ACA抗血清识别。以C—末端—p半乳糖苷酶的融合蛋白建立的ELISA检测抗CENP-B用于诊断结缔组织病，与间接免疫荧光法相比其敏感性达94％一98％，特异性达94％～95％。假阳性结果往往是由于低分子量的细菌蛋白非特异性结合引起。
着丝点抗原序列在不同种哺乳动物细胞中是高度保守的。CENP-A～C在整个细胞周期中均位于着丝点部位，对细胞周期起重要的调节作用。CENP-D与调节染色质密度的蛋白(RC髓)是同源性蛋白，有促进细胞进入分裂期的作用。CENP-E、F仅短暂表达在动原体表面，与
细胞周期相关。
CENP-A～C的特点不像CENP-B和C，CENP-A尚未被克隆，但可用生化方法从鲸脑中提纯。CENP-B位于动原体下面的异染色质内。着丝点的异染色质由。—卫星DNA组成。所谓。—卫星DNA是具有高度多态性重复序列的DNA。CENP-B选择性地结合到。—卫星DNA中特定的17个碱基对序列上，这段序列被称为CENP-B盒。CENP-B可能与结合的DNA形成二聚体，在形成着丝点高级染色质中起重要的调节作用。CENP-C是动原体板内膜的成分之一，在保持动原体的稳定和微管附着到动原体上起重要作用。
3．纯化方法 CENP-A序列与组蛋白H。相似。根据CENP-B能与DNA结合的特性，利用寡核苷酸亲和层析柱将CENP-B从核提取物中提取。
4．抗原序列与表位 CENP-B含有一个158个氨基酸残基的DNA结合区以及20kD二聚体区域。两个高度酸性区域含有谷氨酸和精氨酸残基以及丰富的脯氨酸，易被蛋白酶水解。CENP-B可能作为一种螺线管阻断剂，在形成异染色质的三级结构中起作用。采用荧光原位杂交法检测发现编码CENP-B基因位于染色体21p13区。CENP-C是一个170kD的亲水性碱性蛋白，具有多态性及两个磷酸化位点。
CENP-B分子至少有5个抗原表位，其中一个与CENP-A的表位相同，一个与CENP-C的表位相同。所有CENP抗原至少有两个表位可被绝大多数ACA识别，因而CENP诱导的是多克隆免疫反应。此外，所有ACA均能识别CENP-BC—末端上的一个主要表位。CENP蛋白的原始序列之间没有相似性，可能是经过翻译后的加工、修饰形成了相同的立体构型表位，而不是线性表位。
